ABSTRACT
@#[摘 要] 目的：分析miR-19对PTEN及PI3K-Akt通路的调节作用，揭示miR-19和PTEN对子宫内膜癌KLE细胞侵袭、迁移的影响及其机制。方法：收集2017年5月至2020年8月河北医科大学第一医院收治的74例子宫内膜癌患者经手术切除（术前未接受放化疗等治疗）且病理确诊为子宫内膜癌的肿瘤组织及对应癌旁组织，采用qPCR和WB法检测PTEN在子宫内膜癌组织中的表达水平以及转染miR-19模拟物或抑制物对KLE细胞中PTEN表达的影响。通过TargetScan及双荧光素酶报告基因实验预测并验证PTEN是否为miR-19的靶基因，将KLE细胞随机分为对照（NC）组、miR-19模拟物组和miR-19+PTEN组，分别转染阴性对照片段（miR-NC）、miR-19模拟物或共转染miR-19模拟物+PTEN过表达载体，采用Transwell和细胞划痕实验检测miR-19和PTEN对KLE细胞迁移和侵袭能力的影响，WB法检测对PI3K-Akt通路相关蛋白表达的影响。结果：子宫内膜癌组织中PTEN的mRNA和蛋白表达水平均明显低于癌旁组织（均P<0.01）。miR-19能与PTEN mRNA的3’-UTR特异性结合，上调miR-19的表达能抑制PTEN的mRNA和蛋白的表达，下调miR-19的表达则出现相反的结果（均P<0.01）。与miR-NC组相比，miR-19 模拟物组的迁移、侵袭细胞数以及划痕愈合率均显著升高（均P<0.01），而miR-19+PTEN组的细胞迁移和侵袭能力以及划痕愈合率较miR-19摸拟物组则明显降低（均P<0.01）；与miR-NC组相比，miR-19模拟物组中PTEN蛋白的表达明显降低，而p-Akt 308和p-Akt 473蛋白的表达明显升高，Akt蛋白的表达无明显变化（均P<0.01）；而在miR-19+PTEN组中，p-Akt 308和p-Akt 473蛋白的表达均明显低于miR-19模拟物组（均P<0.01）。结论：miR-19可能通过抑制PTEN的表达从而活化PI3K-Akt通路，进而促进子宫内膜癌KLE细胞的迁移和侵袭。